Guide de l'utilisateur pour les cellules de semis dans un ballon de culture cellulaire à 5 couches
1. Préparez la suspension cellulaire de la concentration requise, alors Mix It With Mediad-Sevely dans un conteneur. Un volume de 30 à 50 ml par couche recommandée.
2.Slowlyadd La solution mixte dans le ballon de culture cellulaire à 5 couches avec une pipette sérologique. Pour éviter les orbubles en mousse, il est recommandé de régler fermement la pipette contre le mur, de permettre à TheStream de s'écouler le long de la pente et d'économiser un peu de liquide dans la pipette à chaque fois.
Remarques: Alors que 10 mlpipette canechisperset de moyenne en bas, la pipette A25 ml n'atteindre que la marque de nid pour disperser le milieu.
3.Position Le ballon multicouche en vertu de la marque de nid vous marque, inclinez-le à 45 ° dans le sens des aiguilles d'une montre et laissez reposer cette position pendant un certain temps pour niveler le theliquide dans chaque couche.
4. Posez-le à plat sur l'établi avec le nid markfacing vers le haut.
5. Secouez-les fromsidetoside pour distribuer uniformément les cellules sur les surfaces de culture.
Remarques: Soyez prudent à Toshake doucement Toavoid Foamor Bubbles et à renverser le liquide de chaque couche.
6.Transfert the Flaskto l'incubateur pour l'incubation
Culture Medium-Remooval
1. Aspiration
Inclinez le flacon45 ° dans le sens des aiguilles d'une montre avec la marque de nid face à vous. Coundrer une verrouillage à un angle de 45 ° tout en inversant le multi-flacons vers vous. Puis redexe la pipette sérologique dans le bas pour plus d'aspiration.
2.Courage
Inclinez le flacon45 ° dans le sens antihoraire avec le nid vous markfacing, versez le messmedia dépensé du ballon.
CONSEILS: ANEST 10 ML Pipetteis sérologique suggéré pour une aspiration pleinement.
Cavalier de cellule
1. Rendez-vous hors du sérum résiduel avec tampon, ajoutez une solution de digestion (≥5 ml par couche) et mélangez uniformément. Ensuite, suivez les étapes 3-4 pour distribuer au réactif dissociant à chaque couche.
2.Laire se dresser 2 min, puis neutraliser et mélanger avec une solution d'inactivation après les étapes 3-4. Tourbillonnant doucement pour déloger complètement les cellules.
3. Transfert la solution dans un tube à centrifugeuse ou d'autres conteneurs par aspiration ou versement.
4. Renseignez le ballon avec du tampon pendant trois fois, puis transférez le tampon dans le tube à centrifugeuse pour le passage et le comptage.
Conseils: Recherchez la vidéo "Nest Multi-Layer Flask" sur YouTube (@ Nestwuxi4075).
